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life-ilab
產(chǎn)品時間:2020-04-14
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產(chǎn)品貨號

產(chǎn)品名稱

品牌

11363735001

Hybridoma Fusion and Cloning Supplement

life-ilab

 

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11363735001 羅氏

雜交瘤融合和克隆補(bǔ)充

 

 分析證書(COA) 公告(PDF)

貨號與規(guī)格    庫存       包裝規(guī)格       安全性

價(jià)格(CNY) 數(shù)量             

11363735001

 

需要從國外調(diào)貨,預(yù)計(jì)到貨時間2020年7月6日- 詳情     10毫升  

安全數(shù)據(jù)表   

相關(guān)類別       雜交瘤媒體補(bǔ)充劑, 雜交平臺, ITS等補(bǔ)品, 無血清培養(yǎng)基, 細(xì)胞培養(yǎng),

更多...

形成      解

打包      pkg 10毫升(50x)

制造商 沒有。    羅氏

運(yùn)入      干冰

儲存溫度      20°攝氏度

 

產(chǎn)品描述

一般說明

培養(yǎng)基補(bǔ)充劑,由白蛋白,胰島素,轉(zhuǎn)鐵蛋白,細(xì)胞因子,膽固醇源,其他定義的有機(jī)和無機(jī)化合物以及胎牛血清組成(終濃度:0.5%)。

HFCS包含人類蛋白質(zhì)。已對從中分離出人類蛋白質(zhì)的原料進(jìn)行了乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HIV-1 / 2抗體測試,發(fā)現(xiàn)呈陰性(根據(jù)當(dāng)前的質(zhì)量控制程序)。

 

應(yīng)用

雜交瘤融合和克隆補(bǔ)充劑(HFCS)被用作正常培養(yǎng)基的補(bǔ)充劑,以支持融合后和克隆過程中B細(xì)胞雜交瘤的生長。HFCS替代飼養(yǎng)細(xì)胞。解凍儲存在液氮中的細(xì)胞后,它還可用于優(yōu)化雜交瘤細(xì)胞的生長。[1] [2]

 

物理形態(tài)

溶液(50x濃縮,pH 7.4);通過孔徑為0.2μm的膜過濾

 

準(zhǔn)備說明

工作濃度: HFCS(50x)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基稀釋為1:50(v / v)。強(qiáng)烈建議您使用RPMI1640。終培養(yǎng)基也應(yīng)包含L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。

 

分析筆記

生物活性:測定了雜交瘤細(xì)胞系的高克隆效率。

 

其他注意事項(xiàng)

僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。

 

Hybridoma fusion and cloning supplement              (HFCs)(50×)              媒體補(bǔ)編              Solution(50×concentrated)

Cat. No. 011 363 735 001 y Version 18

Content version: March 2016   10 ml

產(chǎn)品描述              綜述雜交瘤融合和克隆補(bǔ)充(HFCS)是一種              低血清含培養(yǎng)基補(bǔ)充              胎牛血清(FCS)的替代              雜交瘤細(xì)胞。              HFCS是專門為優(yōu)化細(xì)胞生長而設(shè)計(jì)的              低血清細(xì)胞培養(yǎng)中新融合雜交瘤的篩選和克隆              媒體。              HFCS的特殊組成進(jìn)一步避免了              使用飼養(yǎng)細(xì)胞的必要性。              成分培養(yǎng)基補(bǔ)充劑,包括白蛋白、胰島素,              轉(zhuǎn)鐵蛋白,細(xì)胞因子,膽固醇來源,其他              界定的有機(jī)和無機(jī)化合物與胎兒              小牛血清(終濃度:0.5%)。              HFCS含有人類蛋白質(zhì)。原料來自              人類的蛋白質(zhì)被分離出來              乙肝表面抗原檢測              (HBsAg)以及HIV-1和HIV-2抗體和              發(fā)現(xiàn)是陰性的。              生物學(xué)的              活動              每一批都要進(jìn)行高克隆效率的檢測              雜交瘤細(xì)胞(見圖1)。              配方•溶液(50×濃度,pH7.4);              •通過0.2 m孔徑膜過濾;              •內(nèi)毒素(LAL):10 EU/ml,檢測支原體              工作              濃度              HFCS濃縮液(50×)用1:50(v/v)稀釋              基本培養(yǎng)基。強(qiáng)烈建議使用RPMI              1640年。終培養(yǎng)基還應(yīng)含有L-谷氨酰胺和

-巰基乙醇。              應(yīng)用HFCS是一種血清替代物,含有FCS和              血清白蛋白、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、細(xì)胞因子、膽固醇源和其他特異性              有機(jī)和無機(jī)化合物。              HFCS避免了血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的額外使用              新融合雜交瘤生長培養(yǎng)基              源自SP 2/0,P3X63Ag8.653。              HFCS的特殊組成進(jìn)一步避免了              飼養(yǎng)細(xì)胞的使用。新融合的生長速度              HFCS輔助培養(yǎng)基中的雜交瘤細(xì)胞是              比人內(nèi)皮細(xì)胞要高得多              培養(yǎng)上清液(HECS)-或補(bǔ)充的FCS              中等。雜交瘤HFCS克隆方法的研究              補(bǔ)充培養(yǎng)基比補(bǔ)充培養(yǎng)基更有效率(圖1)。              工具包存儲/              穩(wěn)定性              未開封溶液在1525°C下穩(wěn)定,直到              標(biāo)簽上的有效期。              注:建議配制適當(dāng)?shù)牡确荩苊夥磸?fù)凍融

 

 

程序和所需材料              推薦              媒體              配方              請?jiān)谙卤碇姓业酵扑]的              小鼠源性培養(yǎng)基配方              雜交瘤。              1每種培養(yǎng)基配方可能含有進(jìn)一步的補(bǔ)充劑,例如抗生素、L-谷氨酰胺-              巰基乙醇丙酮酸鈉,非必需              氨基酸。              2含氨基蝶呤的帽子中氨基蝶呤的濃度              介質(zhì)可以通過使用              分離濃縮試劑[補(bǔ)充羥色胺培養(yǎng)基;氨基蝶呤(250×)]。這樣就可以稀釋氨基蝶呤。              3.雜交瘤從含血清培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到無血清培養(yǎng)基              NUTRIDOMA-SP(需要斷奶)(見              備注4)。              4建議將NUTRIDOMA-SP用于SP 2/0              衍生性雜交瘤。              階躍介質(zhì)配方              高血清1低血清1游離血清1              融合•任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •未來作戰(zhàn)系統(tǒng)(用于              再懸浮              之后的細(xì)胞              融合)              任何基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如RPMI 1640)              冷凍•含F(xiàn)CS              •10%二甲基亞砜(v/v)              選擇2•任何基礎(chǔ)              中等(例如。,              RPMI 1640)              •10%未來作戰(zhàn)系統(tǒng)(v/v)              •10%BM              條件H1              (伏/伏)              •HAT介質(zhì)補(bǔ)充,1×              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1×HFCS              •HAT介質(zhì)補(bǔ)充,1×              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1個NUTRIDOMA-CS              •HAT介質(zhì)補(bǔ)充,1×              篩選•參見選擇              克隆•任何基礎(chǔ)              中等(例如。,              RPMI 1640)              •10%未來作戰(zhàn)系統(tǒng)(v/v)              •10%BM              條件H1              (伏/伏)              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1×HFCS              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1個NUTRIDOMA-CS              雜交瘤              文化              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •10%未來作戰(zhàn)系統(tǒng)3(v/v)              •RPMI 1640型/              DMEM(1:1)              •0.5–1%FCS3              (伏/伏)              •營養(yǎng)學(xué)              •RPMI 1640型/              DMEM(1:1)4              •NUTRIDOMASP 1%

 

選擇成功后介紹              陽性組織培養(yǎng)上清液已通過第yi次篩選,下一步是克隆              產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。單細(xì)胞克隆確保              產(chǎn)生感興趣抗體的細(xì)胞              單克隆抗體的分泌              保持穩(wěn)定。              單細(xì)胞克隆有幾種方法,例如。,              通過限制稀釋,在軟瓊脂中生長,流式細(xì)胞術(shù)。              限制稀釋法克隆單細(xì)胞              如下所示。              盡管如此,每一次嘗試都是為了確保              在電鍍之前,電池處于單電池懸浮狀態(tài)              不能保證殖民地不會出現(xiàn)              從兩個粘在一起的牢房里。因此,限制性稀釋克隆少應(yīng)該做兩次              (“再克隆”)產(chǎn)生克隆種群。              處理              說明              •如果許多雜交瘤必須同時克隆              時間,可能值得用              使用10毫升或更大的吸管。一滴就夠了              吸管將輸送大約100微升。              •克隆將在4天后開始出現(xiàn),并且應(yīng)該              準(zhǔn)備在第7-10天開始放映。              •可以從包含多個              克隆體以及僅包含單個              克隆人。              程序請參考下表。              注:雜交瘤應(yīng)健康迅速              在克隆時生長的。

 

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