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Novus Novus 北京代理
產(chǎn)品時間:2020-03-16
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Novus代理 北京華新康信生物科技有限公司

產(chǎn)品列表如下:

產(chǎn)品貨號       產(chǎn)品名稱       品牌

NBP1-71648  Mouse Monoclonal mtTFA Antibody (18G102B2E11)       NOVUS

H00011232-B01P Mouse Polyclonal POLG2 Antibody    NOVUS

NB110-7081H      Mouse anti-Human IgG4 Fc fragment Secondary Antibody (5C7) [HRP] novus

NBP1-78159  Mouse Monoclonal LDL R Antibody (C7)   NOVUS

NB100-56698       Rabbit Polyclonal MyD88 Antibody [IMGENEX: IMG-178]       NOVUS

NBP2-62766  Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit (Colorimetric)     NOVUS

NBP1-47518AF488      Calreticulin Antibody (1G6A7) [Alexa Fluor 488]       novus

北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學領域,由豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術團隊和管理團隊組建而成,主營生物化學試劑,儀器,實驗耗材等。

1廣泛的產(chǎn)品輻射領域,試劑,耗材,儀器等。

2產(chǎn)品種類齊全,北京華新康信與國外諸多生命科學領域*合作眾多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,F(xiàn)avorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凱杰,義翹,sciencell;價格優(yōu)勢品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,F(xiàn)orteBio,CanSyn,Novus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell,   listlabs, ZYMO , ABclonal  , EY laboratories  ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,novus ,americanelements,cayman  , Fisher ,thermofisher ,  nanopore,   日立,  三菱株式會社 ,RD, takara等,緊跟生命科學的發(fā)展,不斷滿足客戶的需求,為各位的科研之路上添磚加瓦!

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4信譽良好,客戶范圍廣,包括清華、北大、交大、復旦、中山等100多所高校,百泰藥業(yè),康龍化成,藥明康德等企業(yè)。

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肽封閉-一種確認抗體特異性的方法。

背景:抗體與目標表位的特異性結合是產(chǎn)生準確表達數(shù)據(jù)所必需的。抗體與非靶標抗原的結合(也稱為非特異性結合)會增加背景信號并使數(shù)據(jù)解釋復雜化。在蛋白質印跡分析中,通常會通過多個條帶輕松識別非特異性結合。但是,在免疫組織化學,ELISA,流式細胞儀,ChIP和其他基于抗體的應用中,非特異性抗體結合的鑒定可能更加困難。

什么是封閉肽?封閉肽是由對應于抗體表位(抗體識別的抗原的特定片段)的氨基酸序列組成的肽。阻斷肽將與靶抗體特異性結合,從而防止隨后的抗體與靶表位結合。

 

封閉肽如何發(fā)揮作用?可以利用抗體對其表位的高親和力來確認結合特異性。用足夠的肽對抗體進行預溫育會占據(jù)所有抗體結合位點,從而阻止樣品中后續(xù)靶蛋白的結合。

運行封閉肽測定后如何知道我的抗體是否特異性?為了確認抗體的特異性,比較用對照抗體和封閉抗體染色的樣品之間的信號強度。如果抗體對目標表位具有特異性,則與封閉抗體一起孵育的實驗樣品將顯示出比對照抗體(單獨的抗體,未封閉)弱的信號。

在Western blot中我的肽封閉數(shù)據(jù)應該是什么樣的?如果抗體與過量的肽一起孵育并且所有結合位點都被占據(jù)(封閉),則與封閉抗體一起孵育的樣品應無信號。

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蛋白質印跡法

介紹

蛋白質印跡使用抗體來識別細胞或組織裂解物中的單個蛋白質。抗體與高度特異性的氨基酸序列結合,稱為表位。由于氨基酸序列因蛋白質而異,因此蛋白質印跡分析可用于鑒定和定量包含數(shù)千種不同蛋白質的裂解物中的單個蛋白質。先,通過SDS-PAGE凝膠電泳根據(jù)蛋白質的大小將蛋白質彼此分離。接下來,通過施加電流將蛋白質從凝膠轉移到膜上。然后可以用對目標靶蛋白具有特異性的一抗處理該膜。下一個,

裂解液的制備

亞細胞定位    推薦緩沖液

全細胞裂解液       NP-40

核    里帕

線粒體    里帕

細胞質    鹽酸

膜結合蛋白    里帕

吸出PBS,并加入冰冷的裂解緩沖液(每融合10 7個細胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL )。請參見下表,以根據(jù)目標蛋白質的亞細胞位置推薦裂解緩沖液。

用冰冷的PBS在冰上洗滌細胞培養(yǎng)皿。

吸出PBS,并加入冰冷的裂解緩沖液(每融合10 7個細胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL )。請參見下表,以根據(jù)目標蛋白質的亞細胞位置推薦裂解緩沖液。

使用細胞刮刀,將粘附的細胞從培養(yǎng)皿上刮下來,并將細胞懸浮液轉移到微量離心管中。如果需要,可以將細胞用胰蛋白酶消化并用PBS洗滌,然后再重懸于裂解緩沖液中。

在4°C下攪拌細胞30分鐘。

在4°C下離心細胞裂解液混合物。時間和離心力因每種細胞類型而異,但是一般指導原則是在12,000 rpm下20分鐘。

將上清液(裂解液)轉移到冰上的新試管中。

樣品制備

確定每個細胞裂解液的蛋白質濃度。

確定要加載的蛋白質量(推薦:10-50μg/泳道),并添加等體積的2X Laemmli緩沖液。

通過將裂解液在樣品緩沖液中于95-100°C下煮沸5分鐘來減少樣品并使樣品變性。僅在抗體數(shù)據(jù)表建議使用非還原或非變性條件時才應跳過此步驟。

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